CGRP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401165-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CGRP2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CGRP2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CGRP2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CALCB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CGRP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401165-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CGRP2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401165-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CALCB codifica o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina 2 (CGRP2), um neuropeptídeo gerado por processamento proteolítico que sinaliza principalmente por meio do receptor semelhante ao receptor de calcitonina (CALCRL), em complexo com proteínas moduladoras da atividade do receptor (RAMPs). O CGRP2 ativa a sinalização acoplada à proteína Gs para elevar os níveis de cAMP e acionar programas transcricionais dependentes de PKA/CREB a jusante, influenciando o tônus vasomotor, a inflamação neurogênica, a transmissão nociceptiva e a comunicação neuroimune. Em vias sensoriais periféricas e centrais, peptídeos da família CGRP coordenam respostas vasculares e imunes à atividade neuronal e modulam a excitabilidade sináptica. A desregulação da sinalização de CGRP tem sido implicada na biologia da enxaqueca, em estados de dor inflamatória e na homeostase vascular, tornando o CALCB um alvo relevante para estudos mecanísticos em modelos neurovasculares e neuroinflamatórios.
CGRP2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CALCB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CALCB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CALCB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CALCB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.