Partículas Lentivirales de Activación (h) cGAS: sc-403354-LAC

El gen humano **MB21D1** codifica la **sintasa de GMP-AMP cíclico (cGAS)**, un sensor citosólico de ADN que cataliza la síntesis de **2′3′-cGAMP** para activar **STING (TMEM173)** y las vías de señalización posteriores **TBK1–IRF3** y **NF-κB**. Esta vía coordina programas génicos de **interferón tipo I** e **inflamación** en respuesta al ADN microbiano, la inestabilidad genómica y el ADN propio mal localizado procedente de micronúcleos o del estrés mitocondrial. La señalización de cGAS se entrecruza con las respuestas al daño del ADN, la regulación de la cromatina, la autofagia y la inflamación asociada a la senescencia, modulando el tono inmunitario innato en distintos tejidos. La actividad desregulada de cGAS–STING se ha implicado en fenotipos autoinflamatorios, la remodelación del microambiente inmunitario tumoral y la neuroinflamación, lo que respalda su uso frecuente en estudios mecanísticos de detección de ácidos nucleicos.

Las partículas de activación lentiviral cGAS (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de MB21D1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral cGAS (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción MB21D1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de cGAS. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo MB21D1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.