Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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cerberus Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417362
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cerberus O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cerberus, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cerberus Anticorpo (C-1): sc-515324
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cerberus Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417362 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CER1 codifica a cerberus, um antagonista secretado de vias-chave de morfogénios que se liga e inibe membros das famílias BMP, NODAL/TGF-β e WNT, modulando gradientes de sinalização extracelular. Por meio dessas interações, a cerberus contribui para decisões de padronização embrionária, incluindo a especificação do mesendoderma e o desenvolvimento neural anterior, ao restringir programas transcricionais dependentes de SMAD e de β-catenina. Foi relatada expressão desregulada de CER1 em contextos que envolvem diferenciação aberrante, transição epitélio–mesênquima e sinalização alterada por fatores de crescimento, o que o torna relevante para estudos de distúrbios do desenvolvimento e de reprogramação oncogénica de vias. Como regulador secretado, CER1 também é útil para investigar o controlo parácrino do destino celular em modelos de diferenciação de células estaminais e de organoides.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cerberus (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CER1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CER1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CER1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cerberus.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CER1 para a investigação da sinalização de cerberus, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CER1 críticos para a função cerberus
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CER1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cerberus Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo cerberus Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CER1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cerberus Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR cerberus (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CER1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CER1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.