CEP70 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406527
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CEP70 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CEP70, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CEP70 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406527 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CEP70 (proteína centrosomal 70) é um fator associado ao centrossoma, implicado na maturação do centrossoma e na organização de microtúbulos durante a progressão do ciclo celular. Ao sustentar a arquitetura centrosomal e a função do fuso, a CEP70 contribui para uma entrada mitótica eficiente, a segregação cromossômica e a manutenção da polaridade celular. A perturbação das redes regulatórias do centrossoma e dos microtúbulos está ligada à instabilidade genômica e a alterações na capacidade proliferativa, tornando a CEP70 relevante para estudos de fidelidade mitótica e controle do citoesqueleto. A disfunção do centrossoma e a dinâmica do fuso desregulada são frequentemente observadas em contextos relacionados ao câncer, posicionando a CEP70 como um ponto útil para investigar mecanismos que conectam a homeostase do centrossoma à proliferação celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CEP70 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CEP70 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CEP70, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CEP70 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CEP70.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CEP70 para a investigação da sinalização de CEP70, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CEP70 críticos para a função CEP70
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CEP70 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CEP70 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CEP70 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CEP70. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CEP70 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CEP70 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CEP70 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CEP70 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.