Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CDK5RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407278
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CDK5RAP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CDK5RAP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CDK5RAP1 Anticorpo (D-1): sc-398764
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CDK5RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407278 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDK5RAP1 (proteína 1 associada à subunidade regulatória de CDK5) é uma enzima radical S-adenosilmetionina localizada principalmente nas mitocôndrias, onde catalisa a modificação pós-transcricional de tRNAs mitocondriais, sustentando a tradução mitocondrial precisa e a integridade da cadeia respiratória. Ao regular a proteostase mitocondrial e a capacidade de fosforilação oxidativa, a CDK5RAP1 influencia o metabolismo energético celular, o equilíbrio redox e as respostas adaptativas ao estresse. Alterações na atividade da CDK5RAP1 têm sido associadas à disfunção mitocondrial e são frequentemente investigadas em contextos de reprogramação metabólica, adaptação à hipóxia e estabilidade do genoma sob estresse oxidativo. Essas vias tornam a CDK5RAP1 um alvo relevante para estudos mecanísticos em biologia do câncer e em outros distúrbios caracterizados por disfunção mitocondrial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CDK5RAP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDK5RAP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDK5RAP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDK5RAP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CDK5RAP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDK5RAP1 para a investigação da sinalização de CDK5RAP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDK5RAP1 críticos para a função CDK5RAP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDK5RAP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CDK5RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CDK5RAP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDK5RAP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CDK5RAP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CDK5RAP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDK5RAP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDK5RAP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.