CDK11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405330

概要

CDK19は、Mediatorキナーゼモジュール内で機能するサイクリン依存性キナーゼをコードしており、RNAポリメラーゼII依存的な転写および転写関連基質のリン酸化を調節します。転写の開始および伸長プログラムの制御を通じて、CDK19は細胞周期の進行、ストレス応答性遺伝子の発現、ならびにMAPKなどの経路に関連するシグナル依存的転写ネットワークに影響を及ぼします。CDK19の活性や発現の破綻は、複数のがんをはじめとする増殖性疾患において観察される増殖制御の異常や転写ネットワークの再配線と関連づけられています。CDK11は多機能なセリン／スレオニンキナーゼで、細胞周期制御、pre-mRNAスプライシング、転写制御に関与しており、ヒト細胞におけるキナーゼネットワーク間のクロストークや代償的シグナル伝達の研究を支えます。

CDK11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCDK19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CDK19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CDK19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CDK11タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CDK11シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CDK19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CDK11の機能に不可欠なCDK19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CDK19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CDK11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCDK11 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CDK19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CDK11 HDRプラスミド（h）および CDK11 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCDK19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCDK19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。