Cdc20B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406774

Visão geral

CDC20B (ciclo de divisão celular 20B) codifica uma proteína semelhante à Cdc20, prevista para participar da regulação associada ao ciclo celular, com similaridade de sequência com coativadores do APC/C que coordenam a proteólise mediada por ubiquitina durante a progressão mitótica. Embora seja menos bem caracterizado do que o CDC20, a expressão e o contexto genômico de CDC20B têm sido associados a programas proliferativos e a estados de diferenciação em tecidos selecionados, sugerindo papéis no controle de transições que acoplam a temporização do ciclo celular à remodelação celular. Assim, a perturbação de CDC20B pode influenciar vias que regem o controle de checkpoints, a estabilidade cromossômica e a degradação proteica regulada. Esses processos são frequentemente alterados no câncer e em outros distúrbios com proliferação desregulada, tornando o CDC20B um alvo útil para estudos mecanísticos do controle do crescimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Cdc20B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDC20B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDC20B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDC20B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Cdc20B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDC20B para a investigação da sinalização de Cdc20B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDC20B críticos para a função Cdc20B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDC20B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Cdc20B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Cdc20B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDC20B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Cdc20B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Cdc20B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDC20B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDC20B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.