Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CD88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419395
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD88 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD88, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD88 Anticorpo (R63): sc-53797
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419395 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
C5ar1 codifica o CD88, o receptor canônico acoplado à proteína G para a anafilatoxina do complemento C5a, e é altamente expresso em células da linhagem mieloide, incluindo neutrófilos, monócitos e macrófagos. Após a ligação do ligante, o CD88 ativa sinalização dependente de Gi que promove quimiotaxia, mobilização de cálcio, vias de MAPK e PI3K, explosão oxidativa e produção de citocinas, integrando sinais do complemento com a ativação da imunidade inata. Esse receptor participa da amplificação inflamatória e do recrutamento de leucócitos, interagindo com a sinalização de receptores Fc e vias de reconhecimento de padrões para moldar respostas de lesão e reparo tecidual. A desregulação da sinalização C5a–CD88 tem sido implicada em modelos de sepse, inflamação autoimune, lesão por isquemia-reperfusão e neuroinflamação, tornando o C5ar1 um alvo útil para estudos mecanísticos em imunopatologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD88 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C5ar1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C5ar1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C5ar1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD88.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C5ar1 para a investigação da sinalização de CD88, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C5ar1 críticos para a função CD88
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C5ar1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C5ar1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD88 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD88 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C5ar1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C5ar1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.