Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CD8-α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400372-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD8-αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD8-α (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD8-α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CD8A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD8-α Anticorpo (D-9): sc-7970
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD8-α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400372-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD8-α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400372-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD8A codifica o CD8-α, uma glicoproteína transmembranar do tipo I que forma homodímeros CD8αα ou heterodímeros CD8αβ em linfócitos T e em um subconjunto de células NK. O CD8-α atua como correceptor no reconhecimento de antígenos restrito ao MHC de classe I, ao se associar ao complexo do TCR e recrutar a LCK para amplificar a sinalização proximal do TCR, sustentando a diferenciação de efetores citotóxicos e a formação da sinapse imunológica. Por meio do seu impacto em vias a jusante, como a fosforilação de ZAP70, a sinalização MAPK e programas transcricionais dependentes de cálcio, CD8A ajuda a moldar respostas antígeno-específicas e a vigilância imune. Alterações na expressão de CD8A e nos padrões de infiltração de células T CD8+ são amplamente usadas como correlatos imunológicos em estudos de infecção, autoimunidade e microambiente tumoral, elucidando mecanismos de evasão imune e disfunção de células T.
CD8-α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CD8A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CD8A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CD8A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CD8A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.