Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CD8-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419576
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD8-α O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD8-α, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD8-α Anticorpo (53-6.7): sc-18913
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD8-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419576 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cd8a codifica o CD8-α, uma glicoproteína transmembrana que forma homodímeros CD8αα ou heterodímeros CD8αβ e atua como correceptor no reconhecimento de células T restrito ao MHC de classe I. Ao associar-se à LCK e ao complexo TCR/CD3, o CD8-α potencializa a sinalização dependente de antígeno, a formação da sinapse imunológica e programas de ativação a jusante que controlam a diferenciação citotóxica, a produção de citocinas e respostas de memória efetora. O CD8-α também contribui para a seleção tímica e a homeostase periférica das células T CD8+, conectando-o a vias que regem o desenvolvimento de células T e a vigilância imunológica. Alterações na função dependente de CD8-α são relevantes em modelos de infecção, imunologia de tumores e inflamação autoimune, nos quais mudanças na frequência de células T CD8+ ou na intensidade da sinalização podem remodelar a patologia tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD8-α (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd8a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd8a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd8a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD8-α.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd8a para a investigação da sinalização de CD8-α, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd8a críticos para a função CD8-α
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd8a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD8-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD8-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd8a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD8-α Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD8-α (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd8a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd8a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.