CD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407287

概要

CD7は、主に胸腺細胞および成熟T細胞に発現する膜貫通型の免疫グロブリンスーパーファミリー受容体をコードしており、シグナル伝達の閾値を調節する相互作用を介して、T細胞の活性化、接着、ならびに免疫シナプスの形成・構築に関与します。CD7に関連するシグナル伝達は、SRCファミリーキナーゼやMAPKに連結した経路と連動しており、T細胞の分化、サイトカイン応答、細胞傷害性エフェクター機能の形成に影響を与えます。CD7の発現変化はリンパ系の生物学における免疫表現型の特徴としてしばしば利用され、T細胞悪性腫瘍モデルや免疫調節異常の文脈で研究されています。表面マーカーであると同時に機能的なシグナル伝達の役割を担うCD7は、T細胞受容体近傍のシグナル伝達ネットワークや系譜プログラムを解析するうえで、扱いやすい解析ノードとなります。

CD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCD7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CD7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CD7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CD7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD7の機能に不可欠なCD7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CD7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCD7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CD7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD7 HDRプラスミド（h）および CD7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCD7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCD7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。