CD68 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419565

Visão geral

Cd68 codifica a CD68, uma proteína de membrana lisossomal/endossomal fortemente glicosilada, enriquecida em monócitos, macrófagos teciduais, micróglia, células dendríticas e osteoclastos. É comumente utilizada como marcador da linhagem de fagócitos e está associada à endocitose, à maturação do fagolisossoma, ao processamento de antígenos e a programas de ativação imune inata que moldam a sinalização inflamatória. Populações mieloides CD68-positivas influenciam o remodelamento tecidual, o metabolismo de lipídios e redes de citocinas no microambiente tumoral e em contextos de inflamação crônica. Alterações na expressão de Cd68 e o acúmulo de células CD68+ são frequentemente estudados em modelos de neuroinflamação, aterosclerose, fibrose e doenças autoimunes como indicadores de ativação e infiltração de macrófagos/micróglia.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD68 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd68 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd68, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd68 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD68.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd68 para a investigação da sinalização de CD68, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd68 críticos para a função CD68
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd68 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CD68 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD68 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd68. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CD68 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD68 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd68 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd68 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.