Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CD53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419561
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD53 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD53, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD53 Anticorpo (B-12): sc-390185
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419561 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cd53 codifica a CD53, uma glicoproteína tetraspanina de superfície celular enriquecida em leucócitos que ajuda a organizar microdomínios de membrana e a coordenar a sinalização de receptores. A CD53 participa da adesão, migração e ativação de células imunes ao modular a função de integrinas e ao se associar a complexos de sinalização que influenciam a remodelação do citoesqueleto e vias de quinases a jusante. Em modelos murinos, os padrões de expressão e a função da CD53 estão intimamente ligados às respostas de células B e T, à apresentação de antígenos e a redes de sinalização inflamatória. A organização desregulada de tetraspaninas, incluindo interações alteradas dependentes de CD53, é frequentemente estudada em contextos de disfunção imune e de biologia de células hematopoéticas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD53 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd53 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd53, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd53 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD53.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd53 para a investigação da sinalização de CD53, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd53 críticos para a função CD53
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd53 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD53 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd53. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD53 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD53 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd53 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd53 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.