CD42a Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405500-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD42aO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD42a (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD42a (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GP9. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD42a Anticorpo (A-9): sc-166420
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD42a Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405500-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD42a Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405500-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GP9 codifica a glicoproteína plaquetária CD42a, um componente central do complexo receptor GPIb-IX-V que medeia a adesão das plaquetas ao fator de von Willebrand sob alto estresse de cisalhamento. Por meio desse complexo, a CD42a sustenta a formação inicial do tampão hemostático e conecta a ligação de ligantes extracelulares a eventos de sinalização intracelular que regulam a remodelação do citoesqueleto, a ativação plaquetária e a estabilização do trombo. A disfunção de GP9 compromete a expressão na superfície e a função do complexo GPIb-IX-V, alterando a dinâmica de adesão plaquetária e as vias de ativação subsequentes. Defeitos genéticos em GP9 estão associados à macrotrombocitopenia hereditária e a fenótipos hemorrágicos compatíveis com a síndrome de Bernard–Soulier, tornando GP9 um locus útil para estudar a biogênese plaquetária e a sinalização de adesão.
CD42a O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GP9 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GP9. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GP9. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GP9 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.