CD362/SDC2/Syndecan-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401392-NIC

SDC2 codifica a sindecana-2 (CD362), um proteoglicano transmembranar de heparan sulfato que organiza as interações célula–matriz ao se ligar, na superfície celular, a componentes da matriz extracelular e a fatores de crescimento. Por meio de suas cadeias de heparan sulfato e do motivo citoplasmático de ligação a PDZ, a sindecana-2 influencia a adesão dependente de integrinas, a dinâmica das adesões focais e a remodelação do citoesqueleto de actina, impactando a migração e a proliferação. O SDC2 participa de redes de sinalização que incluem vias relacionadas a FGF, VEGF e Wnt, modulando a disponibilidade de ligantes e a montagem de complexos de receptores, com efeitos a jusante nas sinalizações MAPK/ERK e PI3K-AKT. A expressão desregulada de SDC2 ou seu “shedding” (clivagem/liberação) tem sido associada a interações estromais alteradas e a fenótipos invasivos em diversos cânceres, tornando-o relevante para estudos de comunicação no microambiente tumoral, sinalização angiogênica e comportamento celular associado à metástase.

CD362/SDC2/Syndecan-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SDC2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SDC2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SDC2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SDC2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.