CD274/PD-L1 CRISPR 활성화 플라스미드(m): sc-425636-ACT
- Target species: mouse
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- CD274/PD-L1 CRISPR Activation Plasmid (m) 는 synergistic activation mediator (SAM) transcription activation system으로 특정유전자 발현을 upregulate하도록 디자인되였습니다.
- CD274/PD-L1 CRISPR 활성화 플라스미드(m)는 1:1:1의 질량 비율로 3개의 플라스미드로 구성되어 있습니다: 비활성화된 Cas9(dCas9) 뉴클레아제(D10A 및 N863A)를 트랜스활성화 도메인 VP64에 융합한 플라스미드와 블라스티시딘 저항 유전자; MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 코딩하는 플라스미드와 하이그로마이신 저항 유전자; 표적 특이적인 20nt 가이드 RNA가 두 개의 MS2 RNA 아파테머에 융합되어 있고, 푸로마이신 내성 유전자
- The resulting SAM complex binds to a site-specific region approximately 200-250 nt upstream of the transcriptional start site and provides robust recruitment of transcription factors for highly efficient gene activation
- CD274/PD-L1 CRISPR 활성화 플라스미드 (m) 및 CD274/PD-L1 CRISPR 활성화 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cd274 전사 개시점 상류의 서로 다른 조절 영역을 표적으로 합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 사용할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 CD274/PD-L1 Antibody (D-8): sc-518027
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
CD274/PD-L1 CRISPR 활성화 플라스미드(m) | sc-425636-ACT | 20 µg | $397.00 |
Cd274는 CD274/PD-L1을 암호화하며, 이는 PD-1(Pdcd1)에 결합하는 면역조절성 I형 막관통 단백질로서 T 세포 수용체 신호를 조절해 효과기 기능, 사이토카인 생성, 세포독성 활성을 제한합니다. 마우스에서 PD-L1 발현은 JAK/STAT 신호전달을 통한 IFN-γ 같은 염증성 자극에 의해 유도되며, NF-κB 및 PI3K–AKT를 포함한 경로들의 영향을 받아 선천면역과 적응면역 반응을 통합합니다. PD-L1은 과도한 활성화를 억제함으로써 말초 관용과 면역 항상성에 기여하지만, 종양 및 만성 염증 조직에서의 비정상적 발현 변화는 면역 회피 및 기능장애 T 세포 상태와 연관됩니다. 이러한 특징으로 인해 Cd274는 면역 체크포인트 생물학, 항원 제시의 맥락, 그리고 기질세포·골수계·림프구 구획 간 상호작용을 연구하는 데 핵심적인 노드가 됩니다.
CD274/PD-L1 CRISPR 활성화 플라스미드(m)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 Cd274 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
CD274/PD-L1 CRISPR 활성화 플라스미드(m)는 인간 세포주에서 Cd274 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 Cd274 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 CD274/PD-L1 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 Cd274 위치를 보존하고 내인성 위치에서 CD274/PD-L1 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 Cd274 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 CD274/PD-L1 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.