CD161 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405895-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD161O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD161 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CD161 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KLRB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD161 Anticorpo (B199.2): sc-58963
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD161 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405895-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD161 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405895-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLRB1 codifica o CD161, um recetor do tipo lectina C (C-type lectin-like) fortemente expresso em subpopulações de células natural killer e de células T, onde ajuda a ajustar os limiares de ativação, a secreção de citocinas e as funções efetoras citotóxicas. O CD161 participa em circuitos imunorregulatórios que controlam a diferenciação dos linfócitos e a migração/homing para tecidos, influenciando programas de sinalização inflamatória e a vigilância imunitária. Alterações na expressão de KLRB1/CD161 e na frequência de linfócitos CD161+ têm sido associadas a desregulação imunitária em inflamação crónica, autoimunidade e em microambientes imunitários tumorais. Como marcador de superfície celular ligado a estados funcionais dos linfócitos, o CD161 é frequentemente utilizado em imunofenotipagem por citometria de fluxo e em estudos mecanísticos das respostas de células NK/T.
CD161 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KLRB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KLRB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KLRB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KLRB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.