CD161 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405895
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD161 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD161, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD161 Anticorpo (B199.2): sc-58963
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD161 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405895 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KLRB1 codifica o CD161 (KLRB1), um recetor do tipo lectina C amplamente expresso em subpopulações de células NK e de células T, incluindo células T invariantes associadas à mucosa (MAIT) e populações semelhantes a Th17. O CD161 participa na sinalização imunorreguladora e na modulação da citotoxicidade e da produção de citocinas através de vias mediadas por recetores que moldam as respostas imunitárias inatas e adaptativas. A expressão alterada de KLRB1/CD161 está associada a estados de ativação imunitária e a contextos inflamatórios, sendo frequentemente utilizada para fenotipar subpopulações de linfócitos funcionalmente distintas em estudos de infeção, autoimunidade e imunologia tumoral. Como recetor de superfície ligado a programas efetores, como respostas enviesadas para IL-17 e homing tecidular, o CD161 oferece um ponto de entrada acessível para dissecar a diferenciação e a função dos linfócitos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD161 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KLRB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KLRB1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KLRB1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD161.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KLRB1 para a investigação da sinalização de CD161, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KLRB1 críticos para a função CD161
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KLRB1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD161 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CD161 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KLRB1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD161 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CD161 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KLRB1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KLRB1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.