CD16慢病毒激活颗粒(h): sc-400544-LAC
- 针对种属：human
- 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
- CD16 慢病毒激活颗粒（h）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，通过细胞慢病毒转导，特异高效地上调目的基因的表达
- CD16慢病毒激活颗粒(h)包含以下SAM激活元素：一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，它融合了转录活化域VP64；一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白；一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素，潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
- 一经转导，形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因，招募转录因子
- 由 CD16 慢病毒激活质粒 (h) 和 CD16 慢病毒激活质粒 (h2) 编码的 gRNA 靶向 FCGR3A 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因激活效率可以用抗体：CD16 Antibody (DJ130c): sc-20052，通过WB、IF或IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
CD16慢病毒激活颗粒(h) | sc-400544-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
CD16慢病毒激活颗粒(h2) | sc-400544-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
人类 FCGR3A 基因编码 CD16（FcγRIIIa），这是一种对 IgG 具有低亲和力的 Fc 受体，主要表达于自然杀伤（NK）细胞、巨噬细胞以及部分单核细胞亚群。CD16 与免疫复合物结合后，会通过携带 ITAM 基序的接头链（FcRγ/CD3ζ）启动信号传导，激活依赖 Src/Syk 的通路，从而调控抗体依赖的细胞毒作用（ADCC）、吞噬作用、细胞因子产生以及先天免疫反应阈值的调节。FCGR3A 的表达水平和受体活性差异会影响 Fc 介导的效应功能，并与免疫失调相关表型有关，这些表型常见于自身免疫、慢性感染和肿瘤免疫生物学等研究领域。因此，CD16 被广泛用作标志物及关键功能节点，用于解析 Fc 受体信号传导、NK 细胞激活程序以及抗体–免疫复合物相关生物学。
CD16 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FCGR3A 表达。
CD16 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在FCGR3A转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性CD16表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 FCGR3A 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。