CD137 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-423447-LAC

O gene Tnfrsf9 de camundongo codifica o CD137 (4-1BB), uma molécula coestimuladora induzível da superfamília de receptores de TNF, expressa em células T ativadas, células NK e outros subgrupos imunes. O engajamento do CD137 promove sobrevivência celular, proliferação e função efetora por meio do recrutamento de adaptadores e da sinalização downstream de NF-κB e MAPK, sustentando uma ativação imune prolongada. Em modelos murinos, a atividade do CD137 influencia o “priming” de células T, a formação de memória e programas de citocinas inflamatórias que moldam a homeostase imune. A sinalização desregulada de CD137 tem sido estudada em contextos de inflamação crônica, autoimunidade, infecção e imunologia tumoral, como reguladora dos limiares de ativação do sistema imune.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD137 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Tnfrsf9 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD137 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Tnfrsf9, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CD137. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Tnfrsf9 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.