CCNB1/cyclin B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400114-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CCNB1/cyclin B1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CCNB1/cyclin B1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CCNB1/cyclin B1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CCNB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CCNB1/cyclin B1 Anticorpo (GNS1): sc-245
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CCNB1/cyclin B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400114-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CCNB1/cyclin B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400114-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNB1 codifica a ciclina B1, uma subunidade regulatória central do complexo quinase CDK1 que impulsiona a transição G2/M e coordena a entrada em mitose. O acúmulo e a translocação nuclear da ciclina B1 promovem processos como condensação dos cromossomos, ruptura do envelope nuclear e montagem do fuso por meio de cascatas de fosforilação rigidamente temporizadas. A atividade de CCNB1 é integrada a vias de sinalização de checkpoints, como ATR/CHK1 e o checkpoint de montagem do fuso, para assegurar a estabilidade genômica. A expressão ou a degradação desreguladas de CCNB1 estão frequentemente associadas a estados proliferativos e instabilidade cromossômica, tornando-o um marcador amplamente utilizado e um nó mecanístico importante em pesquisas de ciclo celular e biologia do câncer.
CCNB1/cyclin B1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CCNB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CCNB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CCNB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CCNB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.