CCL27 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422842
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CCL27 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CCL27, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CCL27 Anticorpo (G-6): sc-390112
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CCL27 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422842 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ccl27a codifica a quimiocina CCL27 (também conhecida como CTACK), uma quimiocina CC associada à pele que ajuda a coordenar o tráfego de leucócitos ao formar gradientes que orientam células T que expressam CCR10 em direção a sítios epiteliais. A CCL27 contribui para a migração celular dirigida por quimiocinas, a vigilância imunológica e a sinalização inflamatória no microambiente cutâneo, influenciando as interações entre queratinócitos e linfócitos infiltrantes. A atividade desregulada do eixo CCL27–CCR10 tem sido associada à inflamação cutânea e ao recrutamento alterado de células imunes em modelos de processos patológicos do tipo dermatite. Em sistemas murinos, portanto, Ccl27a é amplamente estudado para dissecar mecanismos de quimiotaxia seletiva por tecido e de regulação imune epitelial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CCL27 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccl27a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccl27a, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccl27a na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CCL27.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccl27a para a investigação da sinalização de CCL27, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccl27a críticos para a função CCL27
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccl27a para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CCL27 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CCL27 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccl27a. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CCL27 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CCL27 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccl27a para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccl27a definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.