Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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CBX7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424634
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CBX7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CBX7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CBX7 Anticorpo (G-3): sc-376274
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CBX7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424634 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cbx7 codifica a proteína homóloga 7 de chromobox (CBX7), um leitor de H3K27me3 que contém um cromodomínio e atua como componente central do complexo repressivo Polycomb 1 (PRC1), mantendo o silenciamento transcricional estável. Em células de camundongo, a CBX7 contribui para o controle epigenético do comprometimento de linhagem, da regulação do ciclo celular e da senescência ao promover a compactação da cromatina e a repressão de loci ligados ao desenvolvimento e a supressores tumorais. A atividade de Polycomb dependente de CBX7 se cruza com programas de diferenciação e redes de autorrenovação de células-tronco, moldando estados de expressão gênica de longo prazo. A desregulação da repressão mediada por Polycomb, incluindo alterações na função de CBX7, é amplamente estudada na oncogênese, em fenótipos associados ao envelhecimento e em distúrbios do desenvolvimento como um mecanismo de regulação aberrante da cromatina.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CBX7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cbx7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cbx7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cbx7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CBX7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cbx7 para a investigação da sinalização de CBX7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cbx7 críticos para a função CBX7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cbx7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CBX7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CBX7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cbx7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CBX7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CBX7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cbx7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cbx7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.