CBARA1/MICU1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418304-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CBARA1/MICU1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CBARA1/MICU1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CBARA1/MICU1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MICU1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CBARA1/MICU1 Anticorpo (D-10): sc-518183
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CBARA1/MICU1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418304-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CBARA1/MICU1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418304-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MICU1 (CBARA1) codifica uma subunidade reguladora ligante de Ca2+ do complexo uniportador de cálcio mitocondrial, que ajuda a definir o limiar de captação de Ca2+ pela mitocôndria em resposta a sinais de cálcio citosólico. Ao modular a homeostase mitocondrial de Ca2+, a MICU1 influencia a fosforilação oxidativa, o equilíbrio de espécies reativas de oxigênio e o acoplamento entre a sinalização de Ca2+ e a saída metabólica, com efeitos a jusante sobre a apoptose e a adaptação ao estresse. A disfunção de MICU1 tem sido associada a fenótipos neuromusculares e do neurodesenvolvimento, em consonância com seu papel na manutenção da estabilidade bioenergética mitocondrial em tecidos excitáveis. Assim, a MICU1 é amplamente estudada em vias que conectam a sinalização mitocondrial, o metabolismo celular e respostas transcricionais dependentes de Ca2+.
CBARA1/MICU1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MICU1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MICU1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MICU1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MICU1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.