CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401054-NIC

CNR2 codifica o receptor canabinoide 2 (CB2), um GPCR acoplado a Gi/o, enriquecido em células imunes, que modula a sinalização de AMPc, a ativação de MAPK/ERK e as vias PI3K–AKT a jusante de endocanabinoides como 2-AG e anandamida. A sinalização de CB2 regula a migração de leucócitos, a liberação de citocinas, a função de células apresentadoras de antígeno e a homeostase imune, associando-o à resolução da inflamação e às respostas a lesão tecidual. Alterações na atividade e na expressão de CNR2 foram relatadas em diversos distúrbios autoimunes e inflamatórios, na neuroinflamação, na fibrose e na regulação imune associada a tumores, tornando-o um locus útil para estudos mecanísticos de redes imunomodulatórias. O CB2 também interage com a sinalização de quimiocinas e de receptores Toll-like e influencia estados de polarização celular que moldam as respostas imunes inata e adaptativa.

CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CNR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CNR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CNR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CNR2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.