caveolin-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419480

Descripción general

Cav2 codifica la caveolina-2, un componente integral de membrana de las caveolas que coopera con la caveolina-1 para dar forma a las invaginaciones de la membrana plasmática y organizar microdominios de balsas lipídicas. La caveolina-2 influye en la endocitosis y la transcitosis, la mecanotransducción y la compartimentalización de señales en vías que involucran receptores tirosina quinasa, la señalización eNOS/NO y la remodelación del citoesqueleto. En tejidos de ratón, la expresión de Cav2 es prominente en células endoteliales, adipocitos y ciertos compartimentos epiteliales, donde contribuye al tráfico de membrana y a la homeostasis vascular. La biología alterada de las caveolas se ha vinculado a fenotipos cardiopulmonares y metabólicos y a efectos dependientes del contexto sobre la migración y la proliferación celular, lo que convierte a Cav2 en un objetivo útil para estudiar la organización de membrana en modelos relevantes para enfermedades.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO caveolin-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cav2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cav2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cav2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína caveolin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cav2 para la investigación de la señalización de caveolin-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Cav2 críticos para la función de caveolin-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cav2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido caveolin-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido caveolin-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cav2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR caveolin-2 (m) y el plásmido HDR caveolin-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cav2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cav2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.