cathepsin S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419881
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cathepsin S O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cathepsin S, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cathepsin S Anticorpo (E-3): sc-271619
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cathepsin S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419881 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ctss codifica a catepsina S de camundongo, uma protease cisteínica lisossomal com expressão marcante em células apresentadoras de antígeno, nas quais promove o processamento proteolítico de proteínas internalizadas. A catepsina S é um componente-chave da via de apresentação de antígenos pelo MHC de classe II, ao clivar a cadeia invariável e permitir o carregamento de peptídeos, conectando a proteostase endolisossomal à ativação da imunidade adaptativa. Além do processamento de antígenos, a catepsina S contribui para a renovação da matriz extracelular e para a sinalização inflamatória em linhagens mieloides, sustentando estudos sobre o tráfego de leucócitos e a remodelação tecidual. A atividade desregulada de CTSS tem sido associada a patologias mediadas pelo sistema imune e a estados inflamatórios crônicos, motivando pesquisas mecanísticas em modelos de imunologia e inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cathepsin S (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ctss em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ctss, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ctss na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cathepsin S.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ctss para a investigação da sinalização de cathepsin S, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ctss críticos para a função cathepsin S
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ctss para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cathepsin S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo cathepsin S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ctss. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cathepsin S Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR cathepsin S (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ctss para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ctss definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.