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caspase-7双切口酶质粒(h) | sc-401301-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caspase-7双切口酶质粒(h2) | sc-401301-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASP7 编码 caspase-7,这是一种执行者型半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶,在内源性与外源性凋亡信号通路中,位于起始子 caspase 下游被激活。被加工活化后,caspase-7 可切割广泛的底物,推动染色质凝聚、细胞骨架重塑以及细胞的有序解体,并与 caspase-3 协同发挥作用。CASP7 活性与线粒体应激反应、死亡受体通路以及炎症相关背景相互交织,在这些情境下,凋亡性蛋白水解参与塑造组织稳态。caspase-7 信号失调与癌症生物学、神经退行性变及免疫相关病理中所见的细胞死亡阈值改变有关,因此是开展凋亡机制研究的一个有价值节点。
caspase-7 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CASP7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CASP7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CASP7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CASP7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。