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caspase-6双切口酶质粒(h) | sc-402563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caspase-6双切口酶质粒(h2) | sc-402563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASP6 编码半胱天冬酶-6(caspase-6),这是一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶,在凋亡信号中作为执行者半胱天冬酶发挥作用,同时也可参与非凋亡性蛋白水解,影响细胞骨架和细胞核等底物。caspase-6 在内源性与外源性死亡通路下游被激活,并参与蛋白酶级联反应,从而塑造细胞解体过程、炎症串扰以及细胞应激反应。CASP6 活性失调与神经元和免疫细胞异常易损性有关,并在神经退行性变及其他涉及凋亡或蛋白稳态异常的病理中被报道存在关联。这些特征使 CASP6 成为在人源模型系统中探究半胱天冬酶网络层级、底物特异性以及细胞命运决策的有用靶点。
caspase-6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CASP6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CASP6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CASP6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CASP6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。