Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
caspase-12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419463
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- caspase-12 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico caspase-12, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:caspase-12 Anticorpo (1611): sc-21747
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
caspase-12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419463 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Casp12 de camundongo codifica a caspase-12, uma caspase inflamatória implicada na sinalização da imunidade inata e na modulação de cascatas de proteases ligadas ao estresse celular e às respostas inflamatórias. A caspase-12 tem sido associada a vias de estresse do retículo endoplasmático e pode influenciar nós de sinalização que moldam a produção de citocinas e as defesas antimicrobianas. Em modelos murinos, a atividade de Casp12 tem sido estudada no contexto de interações hospedeiro–patógeno e de dano tecidual relacionado à inflamação. Sua relação funcional com outras caspases e com vias de resposta ao estresse a torna relevante para investigar mecanismos subjacentes a fenótipos inflamatórios em modelos de doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO caspase-12 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Casp12 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Casp12, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Casp12 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína caspase-12.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Casp12 para a investigação da sinalização de caspase-12, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Casp12 críticos para a função caspase-12
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Casp12 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo caspase-12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo caspase-12 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Casp12. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo caspase-12 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR caspase-12 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Casp12 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Casp12 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.