casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401148

Übersicht

CSNK2A2 kodiert die katalytische Alpha′-Untereinheit der humanen Casein-Kinase II (CK2), eine konstitutiv aktive Serin/Threonin-Kinase, die zusammen mit regulatorischen Beta-Untereinheiten das CK2-Holoenzym bildet und ein breites Spektrum nukleärer und zytoplasmatischer Substrate phosphoryliert. Die CK2-Signalgebung ist mit zentralen Prozessen wie Zellzyklusprogression, DNA-Schadensantworten, Chromatinregulation und Apoptose verknüpft und moduliert über Substratphosphorylierung wichtige Signalwege wie NF-κB, Wnt/β-Catenin, PI3K/AKT und MAPK. Indem CSNK2A2 die phosphorylierungsabhängige Kontrolle von Transkriptionsfaktoren und RNA-Prozessierungsproteinen prägt, beeinflusst es Proliferation und Stressanpassung. Eine dysregulierte CK2-Aktivität und veränderte CSNK2A2-Expression wurden mit Tumorbiologie, inflammatorischer Signalgebung und anderen phosphorylierungsgetriebenen Pathologien in Verbindung gebracht, was seine Eignung als mechanistischer Knotenpunkt in der biomedizinischen Forschung unterstreicht.

Das casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CSNK2A2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CSNK2A2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CSNK2A2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die casein kinase IIα′-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CSNK2A2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der casein kinase IIα′-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CSNK2A2-Exone abzielen, die für die casein kinase IIα′-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CSNK2A2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CSNK2A2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das casein kinase IIα′ HDR-Plasmid (h) und casein kinase IIα′ HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CSNK2A2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CSNK2A2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.