casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401148

概要

CSNK2A2は、ヒトのカゼインキナーゼII（CK2）α′触媒サブユニットをコードする遺伝子であり、恒常的に活性を有するセリン／スレオニンキナーゼです。CK2は調節性のβサブユニットとともにホロ酵素を形成し、核内および細胞質の多様な基質をリン酸化します。CK2シグナルは、細胞周期の進行、DNA損傷応答、クロマチン制御、アポトーシスなどの中核プロセスと相互に関与し、基質のリン酸化を介してNF-κB、Wnt／β-カテニン、PI3K／AKT、MAPKといった主要経路を調節します。転写因子やRNAプロセシング関連タンパク質のリン酸化依存的な制御を形作ることで、CSNK2A2は増殖およびストレス適応に影響を及ぼします。CK2活性の破綻やCSNK2A2発現の変化は、腫瘍生物学、炎症性シグナル、その他のリン酸化駆動性の病態と関連づけられており、CSNK2A2が生物医学研究における機構的ハブとして有用であることを示しています。

casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCSNK2A2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CSNK2A2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CSNK2A2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、casein kinase IIα′タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、casein kinase IIα′シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CSNK2A2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• casein kinase IIα′の機能に不可欠なCSNK2A2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CSNK2A2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• casein kinase IIα′ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびcasein kinase IIα′ CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CSNK2A2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  casein kinase IIα′ HDRプラスミド（h）および casein kinase IIα′ HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCSNK2A2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCSNK2A2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。