casein kinase IIα Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-418515-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- casein kinase IIα as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- casein kinase IIα As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo casein kinase IIα Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo casein kinase IIα Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor CSNK2A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: casein kinase IIα Anticorpo (E-7): sc-373894
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
casein kinase IIα Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-418515-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
casein kinase IIα Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h2) | sc-418515-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
CSNK2A1 codifica a subunidade alfa catalítica da caseína quinase II (CK2α), uma quinase de serina/treonina constitutivamente ativa que fosforila um amplo conjunto de substratos envolvidos na transdução de sinais, na transcrição e no controle do ciclo celular. A CK2α participa de vias como NF-κB, Wnt/β-catenina e PI3K/AKT, ajudando a coordenar respostas a sinais de crescimento e ao estresse celular. Por meio da regulação de proteínas associadas à cromatina, de fatores da resposta a dano no DNA e de moduladores de apoptose, o CSNK2A1 influencia a sobrevivência celular e a proteostase. A atividade desregulada de CK2 tem sido associada a proliferação alterada e sinalização aberrante em múltiplos contextos de doença, tornando o CSNK2A1 um nó amplamente estudado em redes de fosfo-sinalização.
As Partículas de Ativação Lentivirais casein kinase IIα (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CSNK2A1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais casein kinase IIα (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CSNK2A1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de casein kinase IIα. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CSNK2A1 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.