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casein kinase IIα双切口酶质粒(h) | sc-418515-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
casein kinase IIα双切口酶质粒(h2) | sc-418515-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK2A1 编码酪蛋白激酶 II(casein kinase II, CK2)的催化性 α 亚基(CK2α)。CK2α 是一种组成性活化的丝氨酸/苏氨酸激酶,可对多种底物进行磷酸化,这些底物参与信号转导、转录调控以及蛋白质周转等过程。CK2α 在调控细胞周期进程、DNA 损伤应答和应激信号传递等通路中发挥作用,并通过对核内因子的磷酸化来调节与染色质相关的过程。CSNK2A1/CK2 活性失调与生长信号改变以及异常的磷酸化网络有关,这些现象见于多种疾病背景,包括癌症和神经发育障碍。作为磷酸化调控网络中的关键节点,CK2α 常被用于绘制激酶依赖的调控回路,并界定人类细胞中具有情境特异性的依赖关系。
casein kinase IIα 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CSNK2A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CSNK2A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CSNK2A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CSNK2A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。