casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406678

概要

CSNK1G3は、CK1ファミリーに属する膜関連性のセリン／スレオニンタンパク質キナーゼであるカゼインキナーゼIガンマ3（CK1γ3）をコードします。CK1γ3は多様な基質をリン酸化し、シグナル伝達、タンパク質のターンオーバー、細胞内輸送を制御します。CK1アイソフォームは一般に、Wnt／β-カテニンシグナル伝達、概日時計および細胞周期の制御、ならびにエンドサイトーシスや細胞骨格の組織化に影響する受容体近傍でのリン酸化イベントなどの経路と関わります。これらの役割を通じて、CSNK1G3の活性は、リン酸化依存的なチェックポイント、ユビキチン介在性分解、刺激応答性のシグナル動態に影響し得ます。キナーゼシグナルの破綻やリン酸化ネットワークの変化は、増殖関連および神経生物学的な表現型と結び付けられることが多く、臨床的な転帰を示唆することなく、疾患関連の細胞モデルにおけるCSNK1G3の検討を支持します。

casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCSNK1G3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CSNK1G3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CSNK1G3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、casein kinase Iγ3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、casein kinase Iγ3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CSNK1G3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• casein kinase Iγ3の機能に不可欠なCSNK1G3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CSNK1G3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• casein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびcasein kinase Iγ3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CSNK1G3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  casein kinase Iγ3 HDRプラスミド（h）および casein kinase Iγ3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCSNK1G3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCSNK1G3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。