CAML Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403690-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CAMLO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CAML (h) e o Plasmídeo Double Nickase CAML (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CAMLG. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CAML Anticorpo (B-12): sc-166557
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CAML Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403690-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CAML Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403690-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CAMLG codifica o ligante de ciclofilina modulador de cálcio (CAML), uma proteína associada à membrana do retículo endoplasmático que atua como reguladora da sinalização intracelular de Ca²⁺ e da biogênese de proteínas de membrana. O CAML participa de processos ligados ao influxo de cálcio desencadeado por receptores, à homeostase do RE e ao tráfego ou à estabilização de determinadas proteínas de membrana, influenciando assim vias a jusante que governam a ativação celular, a sobrevivência e as respostas ao estresse. Ele tem sido estudado no contexto da sinalização de células imunes e de redes regulatórias gerais associadas ao RE que moldam a proteostase. A desregulação do manejo de cálcio e das vias de estresse do RE que se cruzam com mecanismos associados ao CAML é relevante para diversas bases biológicas de doença, incluindo disfunção imunológica e adaptações de sinalização associadas ao câncer.
CAML O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CAMLG em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CAMLG. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CAMLG. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CAMLG interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.