Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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calsequestrin 2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419472-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- calsequestrin 2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase calsequestrin 2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase calsequestrin 2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Casq2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:calsequestrin 2 Anticorpo (E-12): sc-390999
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
calsequestrin 2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419472-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
calsequestrin 2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419472-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Casq2 de camundongo codifica a calsequestrina 2, uma proteína de alta capacidade de ligação a Ca²⁺ localizada no lúmen do retículo sarcoplasmático de cardiomiócitos, onde atua como tampão e organiza os estoques de Ca²⁺. Ao interagir com complexos do receptor de rianodina e proteínas juncionais associadas, a calsequestrina 2 ajuda a moldar o acoplamento excitação–contração, a liberação de cálcio induzida por cálcio e a dinâmica de recarga de Ca²⁺ do RS. A disfunção de CASQ2 está associada a alterações no manejo intracelular de Ca²⁺, pós-despolarizações tardias e fenótipos arritmogênicos desencadeados por estresse, tornando-a um nó-chave em vias que governam a estabilidade do ritmo cardíaco. Assim, Casq2 é amplamente estudado em mecanismos de homeostase de Ca²⁺ do RS, sinalização em cardiomiócitos e modelos genéticos de suscetibilidade hereditária a arritmias.
calsequestrin 2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Casq2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Casq2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Casq2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Casq2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.