calsequestrin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419471-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- calsequestrin 1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase calsequestrin 1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase calsequestrin 1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Casq1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:calsequestrin 1 Anticorpo (D-10): sc-137080
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
calsequestrin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419471-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
calsequestrin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419471-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Casq1 de camundongo codifica a calsequestrina 1, uma proteína de alta capacidade de ligação a Ca2+ localizada no retículo sarcoplasmático do músculo esquelético de contração rápida. Ao tamponar o Ca2+ luminal e moldar a cinética de liberação e recaptura, ela ajuda a regular o acoplamento excitação–contração por meio do acoplamento funcional com os canais do receptor de rianodina e com a maquinaria de manuseio de Ca2+ do RS. Alterações na abundância de CASQ1 ou na capacidade de ligação a Ca2+ podem perturbar a homeostase intracelular de Ca2+, influenciando respostas ao estresse durante contrações sustentadas e a suscetibilidade a eventos anormais de liberação de Ca2+. Assim, o Casq1 é amplamente estudado em vias que conectam o armazenamento de Ca2+ no RS, a sinalização dependente de Ca2+ e a fisiologia e patologia do músculo esquelético.
calsequestrin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Casq1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Casq1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Casq1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Casq1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.