calsequestrin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403375-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- calsequestrin 1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase calsequestrin 1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase calsequestrin 1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CASQ1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:calsequestrin 1 Anticorpo (D-10): sc-137080
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
calsequestrin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403375-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
calsequestrin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403375-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASQ1 codifica a calsequestrina 1, uma proteína de alta capacidade de ligação a Ca²⁺ localizada no lúmen do retículo sarcoplasmático no músculo esquelético, onde atua como tampão de Ca²⁺ e ajuda a moldar o acoplamento excitação–contração. Ao modular a disponibilidade luminal de Ca²⁺ e a cinética de liberação de Ca²⁺ pelo receptor de rianodina (RYR1), a calsequestrina 1 contribui para a homeostase de Ca²⁺ e para ciclos coordenados de contração/relaxamento muscular. Alterações na função ou na expressão de CASQ1 podem perturbar a sinalização intracelular de Ca²⁺ e respostas ao estresse associadas à liberação anormal de Ca²⁺, à contratilidade prejudicada e à suscetibilidade a fenótipos de disfunção muscular. Como um nó central no manejo de Ca²⁺ pelo retículo sarcoplasmático, CASQ1 é relevante para estudos mecanísticos de sinalização dependente de Ca²⁺, proteostase e remodelamento metabólico em fibras musculares.
calsequestrin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CASQ1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CASQ1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CASQ1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CASQ1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.