Calregulin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400775

개요

CALR는 다기능성 소포체(ER) 샤페론이자 높은 용량의 Ca²⁺ 결합 단백질인 칼레레튤린(calreticulin)을 암호화하며, 단백질 접힘의 품질 관리와 세포 내 칼슘 항상성 유지에 기여한다. 칼레레튤린은 칼넥신/칼레레튤린 사이클에 참여하여 당단백질의 성숙과 ER 내 보유(retention)를 조정하고, ER 스트레스 신호전달 및 미접힘 단백질 반응(unfolded protein response, UPR)에도 관여한다. ER을 넘어 CALR는 MHC class I 조립을 통해 항원 제시에 영향을 주고, 인테그린 관련 과정들을 통해 세포 부착과 이동을 조절하며, Ca²⁺ 의존적 신호전달 경로와도 연계된다. CALR 기능의 이상 조절은 혈액종양 및 고형암을 포함한 다양한 질환 맥락에서 단백질 항상성(proteostasis)과 면역 신호전달의 변화와 연관되어 왔으며, ER 기능과 세포 상태 조절의 기전 연구를 위한 유용한 핵심 표적이 된다.

Calregulin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CALR 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CALR 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CALR의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Calregulin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Calregulin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CALR 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Calregulin 기능에 중요한 CALR 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CALR 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Calregulin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Calregulin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CALR 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Calregulin HDR 플라스미드 (h) 및 Calregulin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CALR 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CALR 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.