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Calpain 6双切口酶质粒(h) | sc-407700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Calpain 6双切口酶质粒(h2) | sc-407700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 CAPN6 编码 calpain 6,它是 calpain 家族中的一种非典型成员,主要不具备蛋白水解活性;其功能更像是与细胞骨架相关的调控因子,而非经典的钙依赖性蛋白酶。Calpain 6 影响微管稳定性、肌动蛋白重塑以及细胞运动能力,整合多种信号以调控黏附动态与细胞内运输。基于这些作用,CAPN6 常被用于研究调控细胞周期进程、分化程序以及应激适应性细胞骨架重塑的相关通路。已有研究在与肿瘤生物学、血管重塑和发育过程相关的情境中报道 CAPN6 表达或调控的改变,这也支持其作为迁移与表型转换研究中的一个关键机制节点。
Calpain 6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CAPN6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CAPN6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CAPN6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CAPN6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。