C1r Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405842
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C1r O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico C1r, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:C1r Anticorpo (F-7): sc-514105
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C1r Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405842 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
C1R codifica o componente do complemento C1r, uma serino protease que forma o complexo C1 com C1q e C1s para iniciar a via clássica do complemento. Após a ativação, o C1r sofre autoativação e cliva o C1s, propagando a sinalização da cascata do complemento que promove opsonização, depuração de complexos imunes e geração de mediadores inflamatórios. A atividade do C1r está ligada à regulação da vigilância imune inata e à comunicação cruzada com vias de coagulação e inflamação no meio extracelular. A desregulação de C1R tem sido associada a estados alterados de ativação do complemento e a patologia mediada pelo sistema imune, tornando-o relevante para estudos de biologia do complemento e mecanismos de doenças relacionadas à inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C1r (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C1R em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C1R, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C1R na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C1r.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C1R para a investigação da sinalização de C1r, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C1R críticos para a função C1r
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C1R para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo C1r Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo C1r Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C1R. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo C1r Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR C1r (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C1R para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C1R definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.