C1r CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405842

概要

C1Rは、補体系C1r（セリンプロテアーゼ）をコードしており、C1qおよびC1sとともにC1複合体を形成して古典的補体経路を開始します。活性化に伴い、C1rは自己活性化を起こし、C1sを切断して補体カスケードのシグナルを伝播させ、オプソニン化、免疫複合体の除去、ならびに炎症性メディエーターの産生を促進します。C1rの活性は、細胞外環境における自然免疫監視の調節や、凝固・炎症経路とのクロストークにも関与するとされています。C1Rの制御異常は、補体活性化状態の変化や免疫介在性病態と関連づけられており、補体生物学および炎症関連疾患の機序研究において重要な標的となります。

C1r CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるC1R遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、C1R内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、C1Rのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、C1rタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、C1rシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、C1R欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• C1rの機能に不可欠なC1Rエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、C1Rゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• C1r CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびC1r CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、C1R遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  C1r HDRプラスミド（h）および C1r HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはC1Rホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のC1R標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。