C1q-C Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403618-NIC

C1QC codifica a cadeia C do componente do complemento C1q, uma molécula de reconhecimento de padrões que inicia a via clássica do complemento ao se ligar a complexos imunes e a estruturas próprias alteradas. O C1q participa da opsonização, da depuração fagocítica e da modulação imune, conectando o reconhecimento imune inato à ativação subsequente do complemento e à sinalização inflamatória. No sistema nervoso central e em tecidos periféricos, o C1q contribui para a poda sináptica mediada por micróglia, a remoção de detritos e a regulação do ambiente de citocinas, relacionando a biologia do complemento à comunicação neuroimune. A expressão desregulada de C1q/C1QC e a ativação do complemento estão associadas a processos inflamatórios e autoimunes, neurodegeneração e fenótipos de macrófagos associados a tumores, sustentando estudos mecanísticos sobre remodelamento tecidual impulsionado pelo complemento.

C1q-C O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus C1QC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de C1QC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função C1QC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com C1QC interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.