C1q-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419388

Visão geral

C1qc codifica a cadeia C do componente C1q do complemento, uma molécula de reconhecimento que inicia a via clássica do complemento por meio da associação com C1r e C1s e da ligação a complexos imunes, células apoptóticas e estruturas próprias alteradas. Em camundongos, o C1q contribui para a vigilância imune inata ao promover opsonização, depuração fagocítica e a modulação da sinalização inflamatória, com efeitos downstream na ativação da cascata do complemento e em redes de citocinas. Processos dependentes de C1q-C são frequentemente estudados na biologia de macrófagos e micróglia, incluindo remodelamento de sinapses e homeostase tecidual, em que a marcação mediada por complemento pode influenciar mecanismos celulares de poda e depuração. A atividade desregulada de C1q e a ativação do complemento estão associadas a fenótipos inflamatórios e neuroimunes relevantes para modelos de pesquisa em autoimunidade, respostas a infecções e neurodegeneração.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO C1q-C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C1qc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C1qc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C1qc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína C1q-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C1qc para a investigação da sinalização de C1q-C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C1qc críticos para a função C1q-C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C1qc para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo C1q-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo C1q-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C1qc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo C1q-C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR C1q-C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C1qc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C1qc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.