Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
c-Jun Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2): sc-400077-KO-2
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- c-Jun O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico c-Jun, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p-c-Jun Anticorpo (KM-1): sc-822
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
c-Jun Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) | sc-400077-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
JUN codifica a c-Jun, um componente central do complexo de fatores de transcrição AP-1, que integra sinais extracelulares em programas de expressão gênica dependentes do contexto. A c-Jun é rapidamente induzida por sinais de estresse e mitogênicos e é regulada por fosforilação a jusante das cascatas MAPK/JNK, moldando respostas transcricionais que controlam proliferação, diferenciação, apoptose e sinalização inflamatória. Por meio da regulação, dependente de AP-1, de citocinas, enzimas de remodelamento da matriz e reguladores do ciclo celular, a c-Jun conecta a transdução de sinais a alterações na acessibilidade da cromatina e na saída transcricional. A atividade desregulada de JUN/AP-1 tem sido implicada na transformação oncogênica, invasão tumoral e em processos imunes e neuroinflamatórios, tornando-o um nó-chave para estudos mecanísticos em modelos de doenças humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO c-Jun (h2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene JUN em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do JUN, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do JUN na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína c-Jun.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de JUN para a investigação da sinalização de c-Jun, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) JUN críticos para a função c-Jun
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos JUN para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo c-Jun Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo c-Jun Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus JUN. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo c-Jun Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR c-Jun (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia JUN para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo JUN definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.