c-IAP2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400762-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- c-IAP2 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- c-IAP2 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 c-IAP2 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 BIRC3을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 c-IAP2 Antibody (Ac-71): sc-517317
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
c-IAP2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400762-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
c-IAP2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400762-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BIRC3는 사람의 세포성 세포사멸 억제 단백질 2(c-IAP2)를 암호화하며, c-IAP2는 RIPK1 및 관련 어댑터를 유비퀴틴화해 TNF 수용체 슈퍼패밀리 신호전달을 조절함으로써 NF-κB 활성화, 염증성 출력, 그리고 세포사멸 결정 과정을 미세 조정하는 E3 유비퀴틴 리가아제입니다. c-IAP2는 BIR 도메인과 RING 핑거를 통해 유비퀴틴 의존적 방식으로 apoptosis와 necroptosis를 통합적으로 조절하며, 사이토카인 및 스트레스 자극에 대한 반응에서 caspase 활성과 생존 신호를 형성합니다. BIRC3의 기능 또는 발현이 비정상적으로 조절되면 면역 신호전달 변화와 apoptosis 저항성이 동반될 수 있으며, 혈액암을 포함한 여러 암에서 해당 경로의 반복적인 교란이 보고되어 왔습니다. 유비퀴틴–프로테아좀 및 TNF/NF-κB 네트워크의 핵심 노드로서 BIRC3는 염증 신호전달, 세포 생존 체크포인트, 그리고 유비퀴틴 매개 경로 재배선에 관한 연구에서 자주 다뤄집니다.
c-IAP2 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 BIRC3 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 BIRC3 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 BIRC3의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, BIRC3 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.