BVES Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403698

Visão geral

A substância epicárdica de vasos sanguíneos (BVES), também conhecida como POPDC1, é uma proteína associada à membrana, enriquecida em músculo estriado e em tecidos epiteliais, que contribui para a adesão célula–célula e para a polaridade epitelial. A BVES participa de redes de sinalização ligadas à ligação de cAMP, ao tráfego de membranas e à organização do citoesqueleto, ajudando a coordenar a integridade das junções e a arquitetura tecidual. Alterações na expressão ou na localização da BVES têm sido associadas à disrupção da função de barreira e à migração celular aberrante, tornando-a relevante para estudos de transição epitélio–mesênquima e de remodelamento tecidual. Em biologia do câncer e em pesquisa cardiovascular, a BVES é frequentemente investigada por seus papéis na manutenção da organização celular normal e em vias que influenciam a proliferação e a motilidade.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BVES (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BVES em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BVES, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BVES na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BVES.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BVES para a investigação da sinalização de BVES, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BVES críticos para a função BVES
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BVES para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo BVES Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BVES Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BVES. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo BVES Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BVES (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BVES para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BVES definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.