BTG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405339-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BTG1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BTG1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase BTG1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para BTG1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BTG1 Anticorpo (2095C1a): sc-81207
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BTG1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405339-NIC | 20 µg | $410.00 |
BTG1 (gene de translocação de células B 1) codifica uma proteína antiproliferativa da família TOB/BTG que modula a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a apoptose por meio de controle transcricional e pós-transcricional. BTG1 participa de vias que regulam a deadenilação e a renovação (turnover) de mRNA por meio de interações com componentes do complexo CCR4–NOT, e pode influenciar programas transcricionais ligados à quiescência celular e a respostas ao estresse. Em contextos imunes e hematopoéticos, BTG1 ajuda a moldar o desenvolvimento de linfócitos e seus estados de ativação, e a expressão alterada ou a desregulação de BTG1 tem sido associada à proliferação descontrolada. Lesões genéticas envolvendo BTG1 foram relatadas em múltiplos cenários de neoplasias linfoides, sustentando sua relevância em estudos de estabilidade genômica, sinalização oncogênica e controle do crescimento específico de linhagem.
BTG1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus BTG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de BTG1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função BTG1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com BTG1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.