BRCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419362-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BRCA1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase BRCA1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase BRCA1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Brca1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:BRCA1 Anticorpo (287.17): sc-135732
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
BRCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419362-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
BRCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419362-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino *Brca1* codifica a BRCA1, um supressor tumoral multifuncional que coordena o reparo de quebras de dupla fita do DNA com alta fidelidade por recombinação homóloga e promove a proteção da forquilha de replicação. A BRCA1 atua em redes de vigilância do genoma que incluem a sinalização ATM/ATR e o controle de checkpoints, e forma complexos funcionais com parceiros como BARD1, PALB2 e BRCA2 para regular a ressecção das extremidades e o carregamento de RAD51. Além do reparo do DNA, a BRCA1 influencia o remodelamento da cromatina e as respostas transcricionais ao estresse genotóxico, modulando a progressão do ciclo celular e a manutenção da estabilidade genômica. A desregulação de *Brca1* está fortemente associada ao aumento de dano ao DNA, instabilidade cromossômica e fenótipos relevantes para a biologia da predisposição ao câncer em sistemas de mamíferos.
BRCA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Brca1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Brca1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Brca1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Brca1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.