Plásmido Doble Nickase (h) bradykinin B1 R: sc-401169-NIC

BDKRB1 codifica el receptor inducible de bradicinina B1, un receptor acoplado a proteína G cuya expresión aumenta ante señales inflamatorias y daño tisular. Tras su activación por cininas des-Arg, el receptor B1 de bradicinina (bradykinin B1 R) promueve la señalización a través de las vías de Gαq/Gαi, elevando el calcio intracelular y estimulando los programas de MAPK y NF-κB, lo que modula la producción de citocinas, el reclutamiento de leucocitos y las respuestas vasculares. Este receptor participa en redes de señalización inflamatoria y nociceptiva, y se estudia con frecuencia en contextos como la inflamación crónica y los mecanismos relacionados con el dolor, así como la disfunción vascular y el estrés metabólico. La alteración de la expresión y la señalización de BDKRB1 se ha asociado con microambientes inflamatorios relevantes para enfermedades, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico para el análisis de vías en modelos celulares humanos.

bradykinin B1 R El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BDKRB1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BDKRB1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BDKRB1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BDKRB1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.