BMP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400514

Visão geral

BMP2 codifica a proteína morfogenética óssea 2 (BMP-2), um ligante secretado da superfamília TGF-β que sinaliza principalmente por meio de receptores quinase de serina/treonina dos tipos I/II para ativar SMAD1/5/8 e interagir com vias de MAPK. A BMP-2 regula a diferenciação osteogênica e condrogênica, a remodelação da matriz extracelular e o padrão de desenvolvimento, e orienta decisões de destino celular em diferentes linhagens mesenquimais. A desregulação da sinalização de BMP2 tem sido associada a ossificação aberrante, malformações esqueléticas e alterações nos sinais do microambiente tumoral que influenciam proliferação, migração e programas epitélio–mesênquima. Por isso, BMP2 é amplamente estudado em biologia óssea, em modelos regenerativos e em análises de crosstalk envolvendo a sinalização TGF-β/BMP.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO BMP-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BMP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BMP2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BMP2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína BMP-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BMP2 para a investigação da sinalização de BMP-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BMP2 críticos para a função BMP-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BMP2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo BMP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo BMP-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BMP2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo BMP-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR BMP-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BMP2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BMP2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.